【摘要】目的探讨维持精原干细胞及其干细胞特性的关键基因及亮氨酸重复序列(LRR)家族成员Lrrc34在小鼠精原干细胞中的功能。方法应用差异表达基因(DEG)分析、基因本体(GO)分析和京都基因和基因组百科全书(KEGG)分析等生物信息学方法寻找潜在的多能性相关基因。分别采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)、免疫荧光(IF)检测Lrrc34在小鼠精原干细胞中的m RNA和蛋白质表达水平。采用RNA干扰实验研究Lrrc34敲低后对体外培养精原干细胞的瞬时效应。结果我们分别在ID4-EGFP+(G)和ID4-EGFP+/TSPAN8High (TH)、G和ID4-EGFP+/TSPAN8Low (TL)、TH和TL组发现了8、8、11个差异表达基因,并在这些差异表达基因组成的相互作用网络中发现了11个显著的相互作用模块。第五个相互作用模块中与纤维母细胞生长因子2存在相互作用的差异表达基因Lrrc34被选择作为多能性相关候选基因。免疫荧光实验显示Lrrc34特异表达于被LIN28A标记的未分化精原细胞的部分亚群中,RT-PCR证明了Lrrc34高表达于出生后7天和成年小鼠的精原干细胞中。Lrrc34的瞬时敲低导致体外培养的精原干细胞克隆减小,且其转录组和凋亡信号通路发生显著变化。结论 lrrc34在小鼠精原干细胞中高表达;lrrc34是体外培养的精原干细胞增殖的必需因子,通过其转录组和信号通路调节精原干细胞体外扩增。
【关键词】
《建筑知识》 2015-05-12
《中国医疗管理科学》 2015-05-12
《中国医疗管理科学》 2015-05-12
《中国医疗管理科学》 2015-05-12
《现代制造技术与装备》 2015-07-01
《广州大学学报(社会科学版)》 2015-07-03
《阅江学刊》 2015-07-02
《铁道运营技术》 2015-06-25
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